歆语健康发布于 1周前
收藏专家非重型再生障碍性贫血（NSAA）与低增生型骨髓增生异常综合征（MDS-h）是两种临床表现高度重叠的骨髓衰竭性疾病。传统诊断依赖骨髓形态与细胞遗传学，但约30%的MDS-h患者染色体核型正常，使得鉴别诊断尤为棘手。近年来，外泌体作为“细胞信使”在疾病诊断中崭露头角，其携带的蛋白质组信息能否成为鉴别这两种疾病的关键？
2025年10月，发表于《Journal of Proteome Research》的一项研究，首次系统对比了NSAA与MDS-h患者血浆外泌体蛋白质组谱。研究者通过LC-MS/MS技术筛选出130个差异表达蛋白，并进一步通过PRM靶向验证与ELISA实验，锁定APOA1、SERPINF2、C4A三个关键蛋白。本文将深入解读该研究的设计思路、核心发现与临床转化价值，为血液科医生提供一份“分子鉴别诊断工具箱”。
外泌体作为细胞分泌的“信息载体”，广泛存在于血浆中，其携带的蛋白质能反映机体病理状态，且相比实体肿瘤来源的外泌体，血浆外泌体蛋白在血液疾病鉴别中更具优势。该研究纳入20例NSAA患者、10例MDS-h患者及10例健康对照，从外周血浆中提取外泌体，经透射电子显微镜（TEM）和纳米颗粒跟踪分析（NTA）验证合格后，采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）进行蛋白质组学检测。
图1. 机制图
为明确差异蛋白的生物学意义，研究团队进行GO、KEGG与Mfuzz聚类分析。结果发现，MDS-h相关DEPs主要富集于脂质代谢通路（如胆固醇代谢hsa04979），分子功能以“分子功能调节因子、酶抑制剂活性”为主；而NSAA与MDS-h对比的DEPs则集中于信号转导（如黏附斑通路hsa04510）和免疫调节，涉及血小板衍生生长因子结合、补体系统激活等功能。
研究通过平行反应监测（PRM）先对20个候选蛋白进行靶向验证，最终14个蛋白表达趋势与LC-MS/MS一致，其中C4A（NSAAvsMDS-h，P<0.05）、APOA1（MDS-hvs健康对照，P<0.01）、SERPINF2（MDS-hvs健康对照，P<0.05）差异显著。
为进一步确认临床价值，研究采用ELISA对独立队列（10例NSAA、5例MDS-h、5例健康对照）验证：①APOA1在NSAA、MDS-h组均显著低于健康对照（P分别为0.012、0.022），可区分疾病与健康人群；②C4A在NSAA组显著低于健康对照（P=0.030），且低于MDS-h组，可辅助鉴别NSAA与MDS-h；③SERPINF2虽未达统计学显著（NSAAvsMDS-h，P=0.072），但效应量较大（Cohen’sd=1.070），提示扩大样本量后可能显现诊断价值。
图3. 鉴定了差异表达蛋白。NSAA与MDS-h的火山图(A)，以及MDS-h与HC的火山图(B)。上调蛋白用橙色表示，FC>1.5且P<0.05；下调蛋白用绿色表示，FC<1/1.5(≈0.667)且P<0.05。三组中差异外泌体蛋白表达的热图(C)
拓展阅读
本研究首次系统构建了NSAA与MDS-h的外泌体蛋白质组图谱，不仅筛选出APOA1、SERPINF2、C4A等具有鉴别潜力的生物标志物，更从通路层面揭示了两者在代谢与免疫调节方面的本质差异。尽管样本量有限、ELISA验证中部分蛋白未达统计显著，但研究设计严谨，双平台验证（PRM+ELISA）增强了结果的可靠性。
参考文献：
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